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人elisa试剂盒减小实验误差的8要素

2019-01-03

                                        人elisa试剂盒减小实验误差的8要素
人elisa试剂盒的基本原理是抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水 性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;  抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学 和酶学活性; 酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反 应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
在人elisa试剂盒测定中试剂的准备*为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20min以上后,再进行测定,以使人elisa试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。
通常我们做一个实验,出现误差是难免的,我们所要做到的是如何缩小误差的产生,在操作的过程中,我们除了需要多点细心之外,还有一些需要重点注意的地方,今天的文章中,elisa试剂盒厂家的技术人员为您总结出人elisa试剂盒实验缩小误差的8个要点:
一:检验技
应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。
二:使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。
三:仔细阅读说明书
严格按照人elisa试剂盒说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。
四:洗涤彻底
洗板不彻底,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。
五:严控反应时间
反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。
六:注意人elisa试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。
七:评估试剂的实用性
试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定人elisa试剂盒符合要求后方可使用。
八:严格掌握显色时间
显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。

 

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