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人ELISA检测试剂盒基本原理

2019-06-12

ELISA试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。人ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。

人ELISA检测试剂盒基本原理如下:

1、将特定抗体(一抗)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫性。一抗是待测抗体的抗体,识别待测抗体。

2、二抗是一种与酶偶联的抗体,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗识别并结合待测抗体。

3、测定时,固定的一抗先与样品稀释液反应,将样品中待测抗体固定;洗涤后再与二抗反应。每一步之间都要进行洗涤。

4、加入底物,酶作用底物,使之变色。底物被酶催化变为有色产物。

5、产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。

注意:洗涤不是反应步骤,却是决定成败的关键。目的是洗去反应液中没有与固相抗体结合的物质以及在反应中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。

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