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浅谈原代细胞的培育办法

2020-07-30

一:安排块培育法

(1)依照前述办法取材,将安排剪成或切成1mm3巨细的小块,并参加少许培育基使安排湿润。

(2)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块距离0.2 cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面积为17.5cm2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内参加适量培育基盖好瓶塞,将瓶歪斜放置在37℃温箱内。

(3)培育2~4小时,待小块贴附后,将培育瓶缓慢翻转平放,静置培育,动作要轻,严禁摇摆和来回振动,以防因为激动而使小块漂起而造成培育失败,若安排块不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。

二:消化培育法

该办法是选用前述的消化涣散法,将阻碍细胞成长的细胞间质(包含基质、纤维等)去除,使细胞涣散形成细胞悬液,然后分瓶培育。

三:悬浮细胞培育法

关于悬浮成长的细胞,如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化,可选用低速离心分离,直接培育,或经细胞分层液分离后接种培育。

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